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Dans un projet standard, BioProtein Technologies s'engage
à créer 20 animaux fondateurs
(F0). Le faible coût de revient des
embryons et la possibilité de transférer jusqu'à
20 embryons par femelle permet à la Société
de créer un grand nombre d'animaux fondateurs pour
chaque projet. Ceci augmente considérablement la probabilité
d'obtenir une ou plusieurs lignées produisant une protéine
ou un vaccin biologiquement actif, avec un bon niveau d'expression.
Les fondateurs sont sélectionnés pour leur efficacité
à secréter la protéine dans leur lait,
puis sont croisés avec des animaux normaux, pour donner
naissance à la deuxième génération
(F1) de lapins transgéniques. Les
lapins transgéniques F1 sont identifiés par
PCR à partir de biopsies d'oreille. A maturité
sexuelle, les femelles F1 sont inséminées artificiellement
par du sperme non-transgénique. Après un mois
de gestation, du lait peut être collecté, et
la protéine ou le vaccin recombinant est caractérisée
afin de choisir la lignée la plus adaptée pour
la production industrielle et de mettre en place la stratégie
de purification de la protéine (en conditions
BPL, pré-BPF, BPF). En parallèle, du
sperme de mâles transgéniques
F1 (Master Sperm Bank, MSB) est
collecté et cryogénisé dans de l'azote
liquide, selon les recommandations de la FDA et des autorités
réglementaires européennes. Ce sperme servira
à inséminer artificiellement des lapines non-transgéniques
pour donner naissance à la seconde génération
filiale (F2).
Le sperme des mâles transgéniques
F2 (Working Sperm Bank, WSB) est
collecté et conservé dans l'azote liquide. Il
servira pendant 15 à 20 ans à générer
les femelles transgéniques F3 qui seront les productrices
industrielles de lait et de protéine recombinante.
Une lapin peut donner en moyenne 8-10 litres de lait chaque
année avec une portée de 7 lapereaux en moyenne.
Une production à grande échelle peut être
ainsi rapidement atteinte à partir du groupe de fondateurs
dorigine.
La purification industrielle des protéines est réalisée
par nos clients s'ils possèdent les infrastructures
nécessaires ou est sous-traitée à des
sociétés spécialisées et agrées
pour la production et la purification de protéines
dans le respect des normes BPF
(Bonnes Pratiques de Fabrication). Un partenariat
avec Eurogentec permet à BioProtein Technologies de
fournir à ses clients les meilleurs standards en matière
de production de protéines thérapeutiques et
de vaccins recombinants.
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